Extraction and purification of diamine oxidase from marine coproducts, Actes du Vème meeting: Innovation dans le secteur Halio-Alimentaire et Bioproduits: Développement de nouvelles procédures II, Gammarth 27-29 juillet 2015.
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Date
2015
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De maintes coproduits à haute valeur ajoutée demeurent non valorisés. Cette étude a été proposée dans le but de valoriser les coproduits marins spécialement ceux issus des crustacés. Trois espèces de crustacés ont été étudiées, notamment, deux espèces de crevettes, Parapenaeus longirostris et Penaeus kerathurus mais également l’espèce de Squilla mantis a été également étudiée. Un essai à partir d’une source végétale a été effectué à partir des raquettes de figuier de barbarie Opuncia officinalis. La concentration de l’enzyme et le fractionnement a été effectué en utilisant le sulfate d’ammonium à différentes saturations, une centrifugation à froid et à 17000rpm a été utilisée. L’activité enzymatique de la DAO dans l’extrait brut et dans les différentes étapes de fractionnement a été mesurée en utilisant la Putrescine comme substrat et mesurée par spectrophotomètre à une longueur d’onde de 340nm. Des méthodes de chromatographies sur gel ont été utilisées pour la séparation des protéines en fonctions de leurs tailles (SEC, HPLC). La caractérisation de l’enzyme a été effectuée en utilisant la technique de SDS-PAGE et la technique d’électrophorèse On-chip. Le Spectre d’absorption à transformée de Fourrier a été déterminé.Several coproducts with high added value are nowdays not valued. This study was proposed with the aim of enhancing marine coproduts especially from crustacean. Three species of crustacea, two species of shrimp (Parapenaeus longirostris and Penaeus kerathurus) as well as Squilla mantis were used in order to extract and purify the diamine oxidase enzyme (DAO). An essay was also done from a vegetarian source using prickly pear racket of Opuncia officinalis as specie. Concentration and fractionation were performed by the addition of ammonium sulphate, (NH4)2SO4 saturation in stages and cold centrifuged at 17000 rpm. Enzyme activity of DAO crude and DAO fractionation results were tested using substrate Putrescine and measured with a spectrophotometer at a wavelength of 340 nm. Gel chromatographic methods were used for the separation of proteins and a Size Exclusion Chromatography (SEC, HPLC) method was used for the purification of the enzyme. The characterization of the enzyme was done by SDSPAGE and on-chip Electrophoresis. The Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) spectrum was determined.
Journal
Bulletin de l'Institut National des Sciences et Technologies de la MerVolume
42Issue/Article Nr
Numéro spécialPage Range
pp. 39-46Collections