Host Identification of Arthropod Bloodmeals by Agar Electrophoresis

Abstract

Se discuten las condiciones electroforéticas. Usualmente fueron obtenidos resultados óptimos usando agar “Difco Noble” 0.9%; buffer pH 8.4; un potencial iónico en los compartimientos de electrodos de 0.10 y para la preparación del agar de 0.05; condiciones eléctricas 25-60 V. por cm.; una corriente aproximadamente 25 m. A; temperatura cerca de 4°C (suministrada por la evaporación de éter de petróleo de punto de ebullición de 40°C a 60°C) y un tiempo de electroforesis aproximadamente de 23 minutos. Se discute en detalle el método de la preparación de las comidas de sangre de los artrópodos y su aplicación a las láminas para estudio. Dos minutos después de comenzar el experimento electroforético fue aparente que la comida de sangre era adecuada para la prueba de identificación. Cuando fue visible una migración de más de una fracción de Hb hacia el ánodo, la digestión por el artrópodo estaba demasiado avanzada para poder identificar el huésped. Después de un cierto tiempo de digestión (para las comidas de sangre por los artrópodos en conejos después de un día, y para la mayoría de estas comidas en el hombre, después de 48 horas) la Hb no migró hacia el cátodo como una entidad compacta, sino que se separó en tres o más componentes con diferentes sensibilidades a la bencidina. Por lo menos tres de los componentes migraron hacia el ánodo, y por lo menos una fracción siempre se localizó en la posición de la albúmina en el ferograma.

Electrophoretic conditions are discussed. Usually the best results were obtained using agar "Difco Noble" 0.9%, buffer pH 8.4, a potential ion electrode compartments 0.10 and for the preparation of agar of 0.05, 25-60 V electrical conditions per cm., a stream about 25 m. A; temperature about 4 ° C (provided by the evaporation of petroleum ether boiling point of 40 ° C to 60 ° C) and an electrophoresis time approximately 23 minutes. We discuss in detail the method of preparation of blood meals of arthropods and its application to the slides for study. Two minutes after starting the electrophoresis experiment was apparent that the blood meal was adequate for proof of identification. When migration was visible more than a fraction of Hb toward the anode, the arthropod digestion was too late to identify the host. After a certain period of digestion (for blood meals by arthropods in rabbits after a day, and for most of these foods in man after 48 pm) in Hb did not migrate to the cathode as a compact entity but are separated into three or more components with different sensitivities to benzidine. At least three of the components migrated toward the anode, and at least a fraction always located in the position of albumin in ferograma.