Validación del método filtración por membrana para la detección de Vibrio cholerae en aguas marinas

Abstract

En el presente trabajo se describe la validación del método de filtración por membrana para la detección de Vibrio cholerae en aguas marinas. Para tal fin se tuvo en cuenta el método de referencia descrito en el Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. 23th edition. 9260H. Se utilizó como medio de cultivo selectivo el agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa (TCBS), el medio diferencial ChromAgar Vibrio y como medio de enriquecimiento el Agua Peptona Alcalina al 1 % (APA). Como pruebas confirmatorias (cuerda, oxidasa y API20E). Los parámetros de validación determinados fueron límite de detección, sensibilidad, selectividad/especificidad, tasa de negativos y positivos, precisión, exactitud e incertidumbre, los cuales son recomendados para los métodos de tipo cualitativo. Los resultados demostraron un criterio de aceptación del 95 % y óptimo, este último de acuerdo con los parámetros de rendimiento. Adicionalmente, el método resulta ser sensible, reproducible y específico para el microorganismo de interés y apto para su aplicación en laboratorio en la matriz agua de mar evaluada.

This work describes the validation of the membrane filtration method for the detection of Vibrio cholerae in marine waters. The reference method of the Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (23rd edition) section 9260H was taken into account. The selective culture medium was Thiosulfate Citrate Bile Sucrose (TCBS) agar, the differential medium was CHROMagar Vibrio, and 1% Alkaline Peptone Water (APW) was used as the enrichment medium. To confirm the results, string, oxidase and API20E tests were performed. The parameters determined were detection limit, sensitivity, selectivity/specificity, negative and positive rate, precision, accuracy and uncertainty, which are recommended for qualitative methods. The parameters evaluated had an acceptance criterion of 95 %. For the performance parameters, the results obtained met the optimal acceptance criterion. The method is sensitive and specified for the mycobacterium of interest.