La culture primaire de la rétine du Psammomys obesus: un procédé d’évaluation de la capacité antioxydante de biomolécules d’origines marines, Actes du Vème meeting: Innovation dans le secteur Halio-Alimentaire et Bioproduits: Développement de nouvelles procédures II, Gammarth 27-29 juillet 2015.
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2015
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La Rétinopathie diabétique (RD) est une complication grave conduisant à la perte progressive de la fonction visuelle et à la cécité. Il a été suggéré que la rétine neuronale est altérée pendant les premiers stades du diabète. Le rongeur Psammomys obesus (P.ob), un modèle expérimental de diabète type-2, développe des altérations cellulaires de la rétine caractéristiques de la RD. Nous avons établi in vitro un modèle de cellules rétiniennes de P.ob en conditions hyperglycémique afin de tester l’effet de biomolécules antioxydantes d’origines marines telles que la fucoxanthine et l’astaxanthine. Les cellules rétiniennes de P.ob ont été incubées à une concentration normale de glucose (5 mM), ainsi que des conditions d'hyperglycémie 25 et 40 mM pendant 5 jours. Le métabolisme ainsi que la viabilité des cellules ont été évalués par le test MTT, bleu de trypan, et DAPI. Les valeurs MTT ont diminué de façon significative avec les concentrations croissantes de glucose (25 mM (p <0,01); 40 mM (p <0,01). La survie cellulaire a été significativement inhibées par 25 mM de glucose (p <0,05) et 40mm (p <0,05) par rapport aux cellules témoins cultivées dans 5 mM de glucose. Ces résultats suggèrent que les cellules rétiniennes de P.ob peuvent représenter un système fiable de culture cellulaire pouvant être exploité dans la compréhension et le traitement de la maladie.Diabetic retinopathy (DR) is the most common retinal disease leading to the progressive loss of visual function and blindness. It have been suggested that the neuronal retina is altered during the early stages of diabetes. The sand rat Psammomys obesus (P.ob), a spontaneous model of type-2 diabetes, exhibit retinal degeneration under hyperglycemic conditions. We investigated in vitro the alterations of P.ob retinal cells under hyperglycemic condition as a tool to study the protective effect of antioxidant marine molecules. P.ob retinal cells were incubated at a normal concentration of glucose (5 mM) as well as hyperglycemic conditions 25 and 40 mM for 5 days. Mitochondrial metabolism and cell viability were assessed by the MTT test, trypan blue assay, and DAPI staining. MTT values decreased significantly with the increasing concentration of glucose (25 mM (p<0.01); 40mM (p<0.01). Trypan blue exclusion dye revealed that incubation in the presence of 25 and 40mM of glucose, less than 50% of the retinal cells survived compared to control and that the percentages of positive DAPI were significantly inhibited by high glucose 25mM (p<0.05) and 40mM (p<0.05) compared to that in cells cultured in 5mM of glucose. These results suggest P.ob retinal neurons may represent a novel cell culture model system that can be used gain understanding and treatment of the disease
Journal
Bulletin de l'Institut National des Sciences et Technologies de la MerVolume
42Issue/Article Nr
Numéro spécialPage Range
pp. 81-86Collections